Resumen

KYAMBADDE, J.W et al. Mise en évidence de trypanosomes par amplification génique (PCR) chez des malades ougandais présumés atteints de trypanosomiase. Bull World Health Organ [online]. 2000, vol.78, n.1, pp. 119-124. ISSN 0042-9686.  http://dx.doi.org/10.1590/S0042-96862000000100018.

Le diagnostic de la maladie du sommeil (trypanosomiase) se heurte à une difficulté qui tient aux fluctuations du degré de parasitémie. Dans la présente étude, nous avons procédé par amplification génique (PCR) pour mettre en évidence une infection trypanosomienne dans 20 échantillons de sang sur 35 (57,1%) et dans 21 échantillons de liquide céphalo-rachidien (LCR) sur 34 (61,7%) prélevés dans une région du nord-ouest de l’Ouganda où la trypanosomiase est endémique. Au total, 14 échantillons de sang et 13 échantillons de LCR qui, par double centrifugation, s’étaient révélé contenir des trypanosomes, se sont également montrés positifs par la PCR, ce qui indique une bonne concordance entre les deux méthodes. Toutefois, 6 des 21 échantillons de sang (28,6%) négatifs du point de vue parasitologique ont été donnés positifs par la PCR et 8 des 21 échantillons de LCR (38,0%), qui étaient apparus négatifs par double centrifugation, ont été donnés positifs par la PCR. On se trouve donc en présence de 14 échantillons négatifs qui pourraient provenir de cas de trypanosomiase, même si une positivité à la PCR n’est pas la preuve absolue de la présence de trypanosomes. Sur ces 8 échantillons de LCR, 4 avaient été qualifiés de cas aux premiers stades en se basant sur l’absence de trypanosomes et un nombre de leucocytes < 5 par ml. Il s’ensuit que selon les critères actuels, certains cas avancés auraient pu nous échapper et il importe donc d’effectuer des essais cliniques pour voir s’il serait possible de traiter avec succès ces malades en utilisant uniquement le médicament adapté aux premiers stades de la maladie. Les 4 échantillons de LCR restants avaient été considérés comme des cas avancés, en se basant sur le fait que le nombre de leucocytes était > 6 par ml, en dépit de l’impossibilité de mettre des trypanosomes en évidence par double centrifugation. Il existe une règle empirique pour la stadification de la trypanosomiase, selon laquelle la valeur limite se situe à 5 leucocytes par ml ; il semble que cette règle conduise à laisser échapper un certain nombre de cas avancés puisque des trypanosomes ont été mis en évidence dans 4 échantillons de LCR provenant de cas présumés ayant un nombre de leucocytes inférieur à 5 par ml. A noter les 3 cas de trypanosomiase dont les échantillons de sang étaient positifs à l’examen microscopique et dont le LCR contenait > 5 leucocytes par ml, mais qui se sont montrés négatifs par double centrifugation et amplification génique. Ces résultats sont révélateurs d’une absence d’atteinte du système nerveux central malgré un nombre élevé de leucocytes. On constate donc qu’un nombre élevé de leucocytes ne signe pas forcément une atteinte du système nerveux central. Lors d’une analyse précédente au cours de laquelle nous avons soumis les échantillons de LCR à une double centrifugation en procédant également à une numération leucocytaire pour déterminer le stade de la maladie, nous n’avons constaté aucune corrélation entre la présence de trypanosomes et le nombre de leucocytes dans le LCR. Notre étude montre qu’il existe en revanche une forte corrélation entre les résultats de la double centrifugation et ceux de l’amplification génique puisque les échantillons de LCR positifs à l’examen parasitologique l’étaient également par la PCR. En outre, il semble que la PCR soit la méthode de diagnostic la plus sensible car elle a permis de déceler des trypanosomes dans 6 échantillons de sang et 8 échantillons de LCR négatifs à l’examen parasitologique. Elle pourrait donc être utile pour déterminer quels sont les malades présumés atteints de trypanosomiase qu’il faut mettre en observation. Il faudrait également voir ce que ces résultats impliquent sur le plan thérapeutique pour des trypanosomiases jugées aux premiers stades d’après la double centrifugation mais qui seraient à un stade avancé selon la PCR.

Palabras llave : agglutination tests; centrifugation; hematocrit; polymerase chain reaction; trypanosomiasis, African; Uganda.